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(一)冷冻精液的保存 为了在保存过程中不使精于活力下降,在贮存和取精液时应注意以下事项:
1.冷冻精液的包装上须明确标明公牛品种、牛号、生产日期、精于活率及数量,再按照公牛品种及牛号将冷冻精液装入液氮罐提筒内,浸入固定的液氮罐内贮存。
2.定期添加液氮,不使罐内贮存的颗粒冷冻精液或细管精液暴露在液氮面上,且液氮容量不能少于2/3。用绳子拴系的精液包装物,切勿因绳索缠结,使得精液未能浸入液氮内而长时间悬吊于液氮罐中使温度升高。
3.在液氮中提取冷冻精液时,不得提出液氮罐口外,而 置于罐颈之下。要用电简照看清楚,用镊子夹取精液,做到目标准确,动作利索。精液每次脱离液氮时间不得超过5秒钟。
4.贮存精液的液氮罐应放置在干燥、凉爽、通风和安全的专用室内,且要水平放置,不倾斜,还要经常检查盖子是否泄漏氮气。
(二)液氮罐的使用
1.保证安全 不得用液氮罐釆盛装液氧、液态空气,以免对罐体造成氧化腐蚀。新购或长期未用的液氮罐,必须经检查外部无破损、无异常,内部干燥无异物,颈管和盖塞完全、贮精提筒完好,盛装液氮经一天的预冷并观察其损耗率,各项指标合格后方可使用。
2.注入液氮 大液氮贮槽内一般均保持有约2万一3万帕的压力,利用自身压力即可将液氮注入罐内。或者将液氮运输罐的液氮经漏斗注入贮存罐内,为了防止液氮飞溅,可在漏斗内衬一块纱布。切不可将贮存罐作为运输罐倾倒液氮,因罐颈处系塑料粘合易于损坏。
3.贮存精液 各种剂型的精液均须迅速放人经预冷的贮精提筒内,浸入罐内液氮面以下,将提筒底部套入底座,手柄置于罐口的槽沟内。颗粒冷冻精液可装入纱布袋或小瓶内浸入液氮,纱布袋或小瓶系一标签固定在罐口外。
4.取用精液 为了缩短开盖时间,应事先作好准备工作。贮精提筒提至颈管基部,在5秒钟内完成取用精液操作,并注意将精液容器确实再次浸入液氮内。
5.补充液氮 当液氮消耗掉1/2时,即应补充液氮。罐内液氮的剩余量可用称重法来估算,也可用细木条插至罐底,经10秒钟取出,测量结霜的长度宋估算。
6.液氮罐的保养 液氮罐放置在凉爽、通风且干燥的室内,严防撞及。注意保护盖塞和罐的颈管部,此部分质地脆弱易于损坏。罐体不可横倒放置,每年应清洗一次罐内杂质。空罐放置2天后,用40一50摄氏度中性洗涤剂擦洗,再用清水多遍冲洗,使之自然干燥。
(三)冷冻精液的运输 由冷冻精液站提供的冷冻精液必须经过精于活率检查,查验公畜品种、畜号及数量,与标签一致无误后方可用作运输。盛装精液的液氮罐必须确保其保温性能,液氮罐应罩有保护袋或装入木箱内,牢固稳妥,严禁撞击和翻倒。另外运输途中要减少震动,超过期限要注意补充冷源。当精液运达输精站时要办理好交接手续。
(四)冷冻精液的解冻 由于剂型不同,冷冻精液解冻方法也有差别。颗粒冻精解冻的稀释液要另配,细管冷冻精液不需要解冻稀释液。
1.颗粒精液的解冻 先要配制解冻稀释液,一般常用的是2.9%柠檬酸溶液、维生素B12(o.5毫克毫升)溶液、葡柠液(葡萄糖3%、二水柠檬酸钠1.4%)-各种解冻液均可分装于玻璃安瓿中,经灭菌后长期备用。
解冻时,先取1—1.5毫升解冻液放入小试管内,浸入40℃热水中经2—3分钟后投入1—2粒精液颗粒。待溶化1/2—1/3时,即取出精液试管,在常温下轻轻摇动至完全解冻后,检查评定精于活率,然后进行输精。
2.细管精液的解冻 由液氮罐内迅速取出一支细管冷冻精液,立即投入40℃热水中,待精液基本溶化时,用灭菌小剪剪去细管的封口端,装入细管输精器中。细管精液品质检查,可按批抽样评定,不需每支精液均作检查,否则将会减少每头份精液的输精量及输入精于数。
3.注意事项
(1)精液解冻后必须保持所要求的温度,严防在操作过程中温度出现回升或回降。
(2)冷冻精液解冻后不宜存放时间过长,应在1小时内输精。
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